فایل بررسی پپتید های اتصال یابنده به رسپتور Trk Bبر رده های سلولی Sk-ov-3 و Ov-car-3
شرح مختصر: سرطان به عنوان دومین عامل مرگ ومیر بعد از بیماریهای قلبی ساخته شده است،یکی از مهمترین پروتئینهای انکوژن TREKB می باشد که لیگاند اختصاصی آن BDNF(Brain derived neutrophic factor) می باشد وبیان بیش از حد این گیرنده در سرطانهای پروستات و مولتیپل مایلوما و تخمدان و تیروئید مشاهده شده است. BDNF با اتصال خود به گیرنده TRK B باعث دایمراسیون در این گیرنده و ایجاد سیگنالهایی در مسیرآنژیوژنسیس و افزایش میزان تعداد سلولها می شود ،هدف این مطالعه طراحی پپتیدهایی بر علیه گیرنده TRK B (Tropomyosin Receptor B Kinase) به عنوان مهار کننده می باشد،در این مطالعه ابتدا در قسمت Insilico کتابخانه پپتیدی با روش sequencetolerance و backrub ساخته شد و بهینه سازی انرژی پپتید با با استفاده از روش مونتو کارلوانجام شد و پپتیدهایی با حداکثر پایداری بر اساس انرژی توسط نرم افزارRانتخاب شدند و سپس ساختار سه بعدی پپتیدها با استفاده از روش دینامیک مولکولی با استفاده از نرم افزار7 Hyperchem تعیین گردیدو Docking این پپتید ها توسط نرم افزار HADDOCK تکمیل گردید،نحوه اتصال آنها توسط نرم افزار Lighplot انالیز شد و ساختار سه بعدی این پپتید ها با گیرنده توسط نرم افزار PYMOL نمایش داده شد و در نهایت توالی 2 عدد از بهترین پپتیدها با کمترین انرژی توسط شرکت Tag copeghene دانمارک سنتز شدند .
عنوانصفحات
سایتهای اتصال یابنده در رسپتور Trk. 13
فاکتورهای نئوروترفیک وعملکرد آنها 13
ایجاد اسکلتهای انعطاف پذیر پپتیدی.. 34
طبقه بندی پپتیدهای تولیدشده براساس انرژی.. 35
انتخاب بهترین پپتیدها براساس انرژی.. 36
ایجاد ساختار سه بعدی پایدارترین پپتیدها 36
اتصال پپتیدهای طراحی شده باگیرندهTrk B.. 36
بررسی اندرکنشهای پپپتیدی و رسپتور. 38
طرزتهیهFBS دکمپلمان برای استفاده درکشت سلولی.. 41
غلظتهای استفاده شده برای پپتید. 43
مواد مورد استفاده برای جمع آوری کردن(Harvest) سلول. 45
اندازهگیری پروتئین با روش برادفورد. 47
آمادهکردن پروتئینها برای Loading در SDS-PAGE.. 50
آمینواسیدهای شرکت کننده دراندرکنش... 61
نمایش اندرکنشهای گیرندهTrk Bباپپتیدهای طراحی شده. 62
بررسی اثر توکسیک پپتیدهای سنتزشده با آزمون بقا سلول. 65
تعداد مشاهده: 8541 مشاهده
فرمت فایل دانلودی:.doc
فرمت فایل اصلی: docx
تعداد صفحات: 107
حجم فایل:4,283 کیلوبایت